本发明涉及生物医药工程技术领域，具体涉及一种缺失疏水区的人类免疫缺陷病毒I型Tat蛋白突变体序列及其应用。本发明提供的一种人类免疫缺陷病毒I型Tat蛋白突变体，是缺失疏水区的Tat△(31-45)突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还提供了该Tat蛋白突变体在制备HIV免疫原、预防和治疗性HIV疫苗、HIV检测试剂盒中的应用，本发明的Tat△(31-45)突变体蛋白及其金标体颗粒均有助于该蛋白构象的稳定、免疫原性的增强以及该蛋白N端和第46-61位氨基酸表位的展示，有望作为HIV疫苗开发和HIV感染检测诊断的候选抗原。

本发明公开了一种ClfA‑A靶位的金黄色葡萄球菌奶牛乳房炎疫苗的制备方法，提取金黄色葡萄球菌DNA，根据GenBank上已提交的ClfA基因序列，分别设计上游引物与下游引物，且向上游引物与下游引物中分别引入Bam H I和Hind III酶切位点，制得重组质粒pET‑ClfA‑A；进行PCR扩增，将重组质粒pET‑ClfA‑A转入感受态细胞BL21(DE3)中，用IPTG进行诱导，对目的蛋白进行大量表达和纯化；取家兔，免疫后采血获取血清，进行检测；经过免疫程序后采血获取血清，测定抗体效价后，制得金黄色葡萄球菌奶牛乳房炎疫苗。本发明建立的有效的金黄色葡萄球菌凝集因子蛋白(ClfA‑A)的制备，为以ClfA‑A为靶位的疫苗研究，对金黄色葡萄球菌性奶牛乳房炎疫苗的研究提供试验依据。

本发明提供了一种猪支原体肺炎疫苗组合物，所述疫苗组合物包括P46蛋白、NrdF蛋白和/或兽医学上可接受的佐剂；所述疫苗组合物还可包括猪肺炎支原体全菌抗原。本发明还公开了含所述疫苗组合物在制备预防和/或治疗猪支原体肺炎的药物中的应用。所述疫苗组合物中的多免疫原性蛋白可通过基因工程手段对疫苗组合物的组分进行大量重组表达，不仅耗时短，还可便于大规模生产，并且多免疫原性蛋白片段的组合可诱导产生协同的免疫效果；当所述疫苗组合物含多免疫原性蛋白及猪肺炎支原体全菌抗原时，比单独使用全菌疫苗免疫时，猪肺炎支原体全菌抗原的含量显著降低。

公开了灭活的ApxIA、ApxIIA和ApxIIIA毒素、包括所述灭活的毒素的疫苗以及其用于免疫和保护哺乳动物的用途。

本发明涉及一种高效表达鹅星状病毒可溶性衣壳蛋白的ORF2基因的方法及其应用，属于兽用生物制品领域。本发明将鹅星状病毒的ORF2基因根据基因序列功能的不同分为两段表达，表达产物分别为衣壳蛋白capsid precursor(简称cap)和刺突蛋白capsid spike(简称spike)。根据功能区进行分割的两段蛋白可用大肠杆菌、杆状病毒和CHO表达系统进行表达。通过纯化方法获得鹅星状病毒的capsid precursor表达蛋白和capsid spike表达蛋白。表达的衣壳蛋白(capsid precursor)和刺突蛋白(capsid spike)蛋白可用于制备鹅星状病毒亚单位疫苗和卵黄抗体。本发明制备的亚单位疫苗和卵黄抗体具有很好的免疫效果和治疗效果，可应用于预防鹅星状病毒引起的疾病，并具有生产成本低、操作简单、生物安全性好的优点。

本发明涉及治疗用抗癌疫苗及其制备，特别涉及肿瘤细胞系通过免疫调节基因修饰作为抗癌疫苗的制备方法及其在抗肿瘤治疗中的应用，疫苗的主要成分为经过免疫调节基因修饰的肿瘤细胞系，所述免疫调节基因是：GM-CSF，TGF-β，HSP90，TAP-1，IL-4，IL-2，IL-12，B7.1(CD80)，B7.2(CD86)等。

本发明公开了一种结核分枝杆菌的重组DNA疫苗及其制备方法。本发明的重组DNA疫苗通过将基因Ag85B、Rv2029c和Rv1738重组入真核表达载体获得。本发明研究发现，免疫6‑8周龄C57BL/6雌性小鼠后，DNA疫苗Ag85B‑Rv2029c‑Rv1738‑pVAX1可以显著提高小鼠外周血中CD4⁺，CD8⁺T淋巴细胞的比例，增加小鼠脾淋巴细胞抗原特异性Th1型细胞因子IL‑2，IFN‑γ，TNF‑α的分泌，降低小鼠肺、脾的BCG细菌计数，提示该重组DNA疫苗可以有效控制分枝杆菌在小鼠体内的生长繁殖。因此，本发明的重组DNA疫苗可用于结核分枝杆菌感染的预防和治疗。

本发明属于动物细菌基因工程技术领域。具体涉及猪胸膜肺炎放线杆菌血清10型突变菌株、ApxIA蛋白及应用。本发明获得的突变株为一种不含有抗性标记的猪胸膜肺炎放线杆菌血清10型突变菌株猪胸膜肺炎放线杆菌mApxIA‑2KA‑APP10；保藏编号为：CCTCC NO：M 2021378。该菌株含有apxIA基因点突变基因，突变菌株表达的外毒素ApxIA第560位和第686位的两个赖氨酸突变为丙氨酸残基，导致ApxIA溶血活性丧失毒力下降，但仍具有免疫原性。本发明中突变株表达的无溶血活性外毒素ApxIA可在猪传染性胸膜肺炎亚单位疫苗中应用。