本发明公开了基因VII型新城疫病毒标记疫苗株及其应用，属于基因VII型新城疫病毒标记疫苗株的拯救及应用领域。本发明利用已建立的新城疫病毒反向遗传操作平台，将G7株的NP蛋白缺失18个氨基酸并将F蛋白裂解位点进行突变，通过筛选救获一株毒力高度致弱、病毒滴度高的基因VII型新城疫病毒标记疫苗株MG7-NPΔ18+F^mut，其微生物保藏编号为：CCTCC NO：V201505。本发明标记疫苗株在鸡胚中具有高生长滴度和低致病力的生物学特性且遗传稳定。免疫保护试验结果表明，该标记疫苗株免疫原性好，可诱导高水平的保护性抗体，对免疫鸡只实现完全保护，能用于防控目前流行的基因VII型新城疫病毒，并为鉴别疫苗免疫和野毒感染奠定基础。

本发明公开了一种口蹄疫疫苗的免疫佐剂及其应用，属于生物疫苗领域。本发明的一种免疫佐剂为口蹄疫病毒3D蛋白片段。实验证明，表达的3D蛋白片段与抗原配伍后免疫动物，能够加强多表位抗原的免疫原性，产生高水平的保护性中和抗体。体外刺激实验显示，口蹄疫病毒3D蛋白片段单独或与多表位抗原配伍后能够发生淋巴细胞增殖反应，说明本发明的免疫佐剂不仅能够增强免疫反应，并且可用于区分感染和免疫动物，是一种很好的免疫刺激剂和疫苗分子标记。

本发明提供了鸡IB病毒S1蛋白的通用性CD8+T细胞抗原表位多肽，属于基因和蛋白质工程领域。本发明根据单倍型鸡MHC I类分子的结合基序，在IBV病毒的S1基因氨基酸序列中筛选符合结合基序列的表位多肽21条；然后用构建的3种含有不同亚型IBV的S1基因的DNA重组质粒免疫SPF鸡，取其淋巴细胞，采用ELIspot法测定上述21条多肽诱导鸡脾淋巴细胞分泌IFN-γ的能力，最终筛选得到四条IBV通用功能性T细胞抗原表位多肽，其序列分别如SEQ ID NO.1-4所示。本发明提供的四条表位多肽联合使用可用于制备IBV通用疫苗。本发明还提供了用于筛选IBV S1蛋白功能性T细胞抗原表位的方法。

本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合症病毒基因工程亚单位疫苗，其包含融合蛋白以及医药学上可接受的载剂，所述融合蛋白具有SEQ ID NO:2所示序列。本发明提供的所述疫苗无任何毒性，安全性高，免疫原性好，能够在猪体内产生较强的体液免疫，免疫后的猪能够抵御强毒攻毒，并且还可以使用生物反应器大规模无血清悬浮培养制备，具有质控容易、批次间稳定、生产成本低等优点。

一种采用微载体高密度细胞培养技术生产猪瘟活疫苗的方法，其特点是将传代贴壁细胞MPK细胞接种到装有微载体的生物反应器中，细胞生长所需的培养基灌注到生物反应器，MPK细胞在反应器内快速增殖，当细胞密度稳定后接种猪瘟病毒，并开始连续收获猪瘟病毒培养液，得到的病毒培养液经澄清、浓缩，在加入稳定剂和缓冲液配苗后，真空冷冻干燥制成猪瘟活疫苗。本发明采用微载体高密度细胞培养技术，细胞密度在生物反应器内可达到8～16×10⁶个/ml，病毒培养液的收获量比转瓶培养的提高了20～40倍，显著提高猪瘟活疫苗生产效率和产量，降低生产成本，减轻疫苗的副反应，增强疫苗生产的批次稳定性，得到更为安全有效的猪瘟活疫苗。

基于合成的吡喃葡萄糖基脂佐剂(GLA)的有益免疫学佐剂特性的发现，本申请公开了包括用于诱导或增强免疫应答的疫苗和药物组合物的组合物和方法，所述合成的吡喃葡萄糖基脂佐剂以基本上同质的形式提供。化学定义的合成的GLA提供了批次之间一致的疫苗组分而没有沾染物或活性的波动，该波动损害天然产物佐剂。还提供了包括抗原、钟样受体(TLR)激动剂、辅佐剂和诸如药物载体的载体中的一种或多种以及GLA的疫苗和药物组合物。

本发明描述了用于制备抗原组合物的方法，该抗原组合物可用于制备用于猪的即用型疫苗，以用于预防或减少M.hyo或PCV2的感染以及疾病的相关症状。所述方法的特征在于，其包括将PCV2抗原与吸附至氢氧化铝佐剂的M.hyo抗原的预先形成的抗原/佐剂复合物混合的步骤。这样可以制备出PCV2/M.hyo组合疫苗，其单次施用后已经对单一或组合感染时的M.hyo和PCV2的感染和疾病高度有效。此外，所述疫苗在施用时具有非常好的安全性，是即用型，并且在经济上是可行的。

本发明公开了一个针对HIV-1 gp41的多肽疫苗设计及其制备方法。该多肽疫苗是通过比较EIAV的致病株和疫苗株的gp45在一级结构和三级结构上的不同，找到两个毒株gp45结构上的差异，获得EIAV疫苗株产生的结构基础，并通过分析HIV-1 CRF07BC gp41一级结构和三级结构，在HIV gp41中模拟EIAV在减毒过程中产生的天然突变位点，表达了用来作为HIV gp41免疫原的多肽疫苗。该多肽以HIV gp41为主体，通过突变gp41上的三个关键位点而得到，三个突变位点分别为A559S、I560M和Q563T。通过PCR方法得到构建好的HIV gp41多肽疫苗表达序列，克隆入pET30原核表达载体，转化大肠杆菌并高效表达，并经过WB免疫印迹实验验证其表达效果。此设计为构建新型的gp41多肽疫苗和其它艾滋病疫苗奠定了一定的基础。