本发明公开了一种PCV2重组杆状病毒样颗粒亚单位疫苗及其制备方法,所述疫苗以昆虫作为宿主细胞,转染包含PCV2重组杆状病毒ORF2基因片段的真核表达载体,所述PCV2重组杆状病毒ORF2基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述真核表达载体为pAcGP67‑A‑PCV2。所述方法利用分子生物学手段构建含有高免疫原性PCV2ORF2核苷酸序列的重组杆状病毒,所述重组病毒能够在Sf9细胞系中高效表达PCV2衣壳蛋白,并在胞质内组装成具有PCV2表面抗原的PCV2病毒样颗粒。对收获的病毒原液进行过滤系统处理和灭活,辅之以佐剂,制成免疫性高、安全性好的PCV2重组杆状病毒样颗粒亚单位疫苗。
本发明公开了一种牦牛源轮状病毒重组VP6蛋白抗原与应用。本发明的牦牛源轮状病毒重组VP6蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;重组VP6蛋白具有良好的抗原性和免疫原性,能够在原核系统中高效表达,本发明的间接ELISA检测方法优于商品化检测试剂盒,为我国BRV抗体检测和血清流行病学调查提供了一种快速、简便、实惠的诊断方法,它解决了目前对犊牛轮状病毒腹泻的诊断方法存在着费时、费力、生物试剂和仪器设备昂贵的弊端。同时本发明的亚单位疫苗在小鼠中具有良好的保护效果,可用于预防由BRV引起的腹泻。
本发明提供一种纳米疫苗和两种疫苗组合物,纳米疫苗为DSPE‑PEG2000‑抗原肽,疫苗组合物由DSPE‑PEG2000‑CpG和上述纳米疫苗中的DSPE‑PEG2000‑抗原肽组成;以及另一种疫苗组合物由DSPE‑PEG2000‑抗原肽和佐剂Montanid ISA 51VG ST组成,本发明还提供了上述疫苗组合物的制备方法以及纳米疫苗和疫苗组合物在制备肿瘤免疫药物中的应用。上述纳米疫苗和两种疫苗组合物进入机体后可有效靶向引流淋巴结,制备方法所需的材料均为FDA批准的医用材料,有临床应用潜力;通过将抗原和佐剂同负载于一个疫苗组合物中共同投递,集载体、抗原和佐剂于一体,可以充分刺激免疫细胞,进一步增强下游的各种免疫应答。