专题库详情
您的位置:专题库 > 专题库详情

基本信息

摘要:本发明公开了一种具有免疫保护作用的迟缓爱德华菌鞭毛蛋白FlgJ在亚单位疫苗中的应用,利用原核表达方法制备得到该重组蛋白,具体包括:以迟缓爱德华菌ET‑CL基因组序列为模板,PCR扩增flgJ基因;构建pMD18‑T‑flgJ载体,对flgJ基因进行序列测定;构建重组表达载体pET‑32a‑flgJ;将重组表达载体转化DH5α感受态细胞,挑取单克隆进行PCR和双酶切验证,获得阳性克隆,提取质粒,测序;转化BL21工程菌,进行重组蛋白的原核表达;利用SDS‑PAGE分析重组蛋白表达情况;对重组蛋白进行Western blot验证。本发明通过原核表达系统对迟缓爱德华菌鞭毛蛋白FlgJ进行表达纯化,通过动物实验证明该重组蛋白具有免疫保护力,表明该重组蛋白能够用于研制迟缓爱德华菌亚单位疫苗。

摘要附图: