基本信息

• 发明名称： 【发明专利】 CRISPR/Cas9和Cre/lox系统编辑伪狂犬病毒基因组制备疫苗方法和应用
• 申请日： 1970-08-22
• 申请号/专利号： CN201510295990.0
• 专利权人： 何启盖;余腾;傅振芳;孙乐强;曹云兹;曹罡;朱琦;梁勋
• 申请人： 华中农业大学
• 分类号： A61P31/22,C12N15/85,C12N7/01
• 发明人/设计人： 何启盖;余腾;傅振芳;孙乐强;曹云兹;曹罡;朱琦;梁勋
• 公开日/公告日： 1970.08.22
• 优先权号： A61P31/22,C12N15/85,C12N7/01
• 代理机构： 武汉开元知识产权代理有限公司 42104
• 代理人： 王和平
• PCT申请号： 无
• PCT申请日期： 无
• PCT进入国家阶段日： 无
• 生物宝藏信息： 无
• 审查员： 无

摘要：本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9基因编辑系统和Cre/lox重组系统编辑伪狂犬病毒基因组快速制备疫苗的方法及其应用；该方法利用CRISPR/Cas9基因编辑系统同时高效地将GFP基因和mCherry基因分别重组到伪狂犬病毒gE基因和TK基因位点，得到gE基因和TK基因的条件性缺失毒株。纯化后，再利用Cre/lox系统将伪狂犬病毒重组毒基因组中的外源GFP和mCherry基因切除，进而快速纯化得到缺失gE/TK双基因缺失的伪狂犬病毒活疫苗。对多基因同时进行操作，将传统方法中多基因敲除的多轮流程，缩减到一轮；同时，CRISPR/Cas9和Cre/lox系统对病毒基因的高效率编辑，将三十代左右的空斑纯化过程，简化到3-4代，大幅提高了病毒疫苗制备的效率，是有效防控变异伪狂犬病毒更大范围流行和减少重大经济损失的有力保证。

摘要附图：