基本信息
摘要:本发明公开了一种具有免疫保护作用的迟缓爱德华菌鞭毛蛋白FliC在亚单位疫苗中的应用,利用原核表达方法制备得到该重组蛋白,具体包括:PCR扩增fliC基因;构建pMD18‑T‑fliC载体,对fliC基因进行序列测定;测序结果正确的菌株扩大培养,提取质粒,获得纯化目的基因;构建重组表达载体pET‑32a‑fliC;将重组表达载体转化DH5α感受态细胞,获得阳性克隆,提取质粒,测序;进行重组蛋白的原核表达;利用SDS‑PAGE分析重组蛋白表达情况;对重组蛋白进行Western blot验证。本发明通过原核表达方法获得大量纯化的迟缓爱德华菌鞭毛蛋白FliC的重组蛋白,并进一步利用动物实验评估该重组蛋白的免疫原性和对于模型动物的保护力,表明迟缓爱德华菌鞭毛蛋白FliC能够用于研制亚单位疫苗。
摘要附图: