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基本信息

摘要:本发明公开了一种沙门菌基因突变株灭活疫苗的制备方法及应用,利用λ‑Red系统制备获得鸡白痢沙门菌pagC基因缺失突变株ΔPagC。取过夜培养的ΔPagC菌液,1:100接种到50ml液体LB培养基中,37℃、180rpm振荡培养至OD值约0.8;加入终浓度为0.4%的甲醛溶液,继续振荡培养16h,4℃、5000rpm离心10min后收集菌体,用无菌的PBS缓冲液洗涤重悬3次后获得原液。调整好剂量与佐剂1:1混合,充分乳化后接种动物。本发明通过制备沙门菌灭活疫苗,疫苗株接种小鼠后无不良反应,可保护小鼠应对鸡白痢沙门菌CVCC1800、肠炎沙门菌ATCC19585和鼠伤寒沙门菌CVCC542的感染。该疫苗能够能够与基于PagC蛋白的沙门菌抗体间接ELISA检测试剂盒联用,实现沙门菌人工免疫和自然感染的鉴别诊断,表现出良好的DIVA特性。

摘要附图: