基本信息
摘要:本发明提供了一种中国虹鳟传染性造血器官坏死病核酸疫苗及其应用,所述中国虹鳟传染性造血器官坏死病核酸疫苗的制备方法包括以下步骤:(1)设计扩增J基因型传染性造血器官坏死病毒表面糖蛋白(Glycoprotein,G)基因的特异性引物;(2)利用病毒敏感细胞系培养IHN病毒分离株,然后提取病毒基因组RNA;(3)采用步骤(1)所得引物对步骤(2)所得的病毒基因组RNA进行一步法RT?PCR扩增;(4)将步骤(3)所得的回收产物与pMD19?T simple载体连接,将连接产物转化DH5α感受态细胞,挑取单菌落,扩大培养后提取质粒进行PCR鉴定,将鉴定正确的质粒进行测序;(5)将步骤(4)鉴定正确的IHNV病毒分离株糖蛋白基因利用BamH I和Xho I酶切位点克隆到真核表达载体pcDNA3.1上,构建核酸疫苗。
摘要附图: