基本信息
摘要:本发明公开了一种沙门菌菌蜕疫苗的制备方法及应用,利用λ‑Red系统制备获得鸡白痢沙门菌pagC基因缺失突变株ΔPagC;取过夜培养的ΔPagC菌液,1:100接种到50ml液体LB培养基中,37℃、180rpm振荡培养至OD值约0.8;4℃,5000rpm离心10min后用无菌的PBS缓冲液洗涤3次,然后用终浓度为50μM的MAP溶液重悬菌体至OD值为0.3,21℃恒温静置16h,4℃、5000rpm离心10min收集菌体,进行灭菌效果检测和核酸残留检测;检测合格后调整剂;与佐剂1:1混合,充分乳化后接种动物。本发明疫苗株接种小鼠后无不良反应,可保护小鼠应对鸡白痢沙门菌CVCC1800、肠炎沙门菌ATCC19585和鼠伤寒沙门菌CVCC542的感染;该疫苗能够能与基于PagC蛋白的沙门菌抗体间接ELISA检测试剂盒联用,实现沙门菌人工免疫和自然感染的鉴别诊断,表现出良好的DIVA特性。
摘要附图: