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基本信息

摘要:本发明涉及一种中国虹鳟传染性造血器官坏死病核酸疫苗及其应用,其制备方法包括以下步骤:(1)设计扩增J基因型传染性造血器官坏死病毒表面糖蛋白(Glycoprotein,G)基因的特异性引物对;(2)利用病毒敏感细胞系培养IHN病毒分离株,然后提取病毒基因组RNA;(3)采用步骤(1)所得引物对步骤(2)所得的病毒基因组RNA进行一步法RT‑PCR扩增,将RT‑PCR扩增产物经电泳后回收产物;(4)将步骤(3)所得的回收产物与pMD19‑T simple载体连接,将连接产物转化DH5α感受态细胞,挑取单菌落扩大培养后提取质粒并进行PCR鉴定,将鉴定正确的质粒进行测序;(5)将步骤(4)鉴定正确的IHNV病毒分离株糖蛋白G基因开放阅读框部分利用BamH I和Xho I酶切位点克隆到真核表达载体pcDNA3.1上,构建核酸疫苗。

摘要附图: