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基本信息

摘要:本发明提供了生产猪圆环病毒2型衣壳蛋白Cap颗粒样疫苗的方法,该方法以GenBank中PCV2-TJ毒株基因序列为模板,运用常规PCR方法扩增得到PCV-2衣壳蛋白Cap的成熟编码序列。将此基因与毕赤酵母分泌型表达载体pP-secSUMO3连接,构建pP-secSUMO3-Cap重组质粒,并用热激法转化大肠杆菌JM109进行扩增。阳性重组质粒经纯化处理后用BioRad公司电转仪电转化毕赤酵母菌株GS115。抗生素ZeocinTm浓度梯度筛选高拷贝菌株,分别提取这些高拷贝菌株的基因组DNA,以此为模板做PCR反应鉴定阳性克隆。通过仔猪攻毒试验,验证该颗粒样疫苗具有良好的免疫保护作用。

摘要附图: