基本信息
摘要：本发明公开了一种用于医学领域的新型冠状病毒肺炎dsRNA疫苗的制备方法，扩增nCoV2019的靶向干扰基因shRNA序列，所得产物与空干扰载体pSilencer经BamH I和Hind III酶切而构建干扰载体pSilencer‑shRNA，该干扰载体经感受态大肠杆菌DH5a扩增和shRNA插入正确性鉴定后，用Hind lII和EcoR I同时酶切pSilencer‑shRNA和空穿梭载体pDC312，构建穿梭载体pDC312‑shRNA，使其与腺病毒骨架质粒pBHGloxAEl共转染HEK293细胞，在胞内同源重组而获得重组腺病毒Ad‑shRNA，再经HEK293细胞多次扩增和纯化制备nCoV dsRNA疫苗，通过喷雾接种，重组腺病毒载体Ad将shRNA导入呼吸道上皮细胞并在细胞内合成dsRNA，继之特异性诱导同源的nCoV mRNA降解，产生抗nCoV2019的转录后基因沉默或RNA干扰。
摘要附图：
